Меню
Главная
Авторизация/Регистрация
 
Главная arrow Химия arrow Технология полимеров медико-биологического назначения. Полимеры природного происхождения

14.2. Производство внеклеточного лектина сапрофитных спорообразующих бактерий рода Bacillus

14.2.1. Общие принципы организации производства

Для получения внеклеточного лектина штамма сапрофитных спорообразующих бактерий Bacillus subtilis ИМВ В-7014 (далее штамм В-7014) в Институте микробиологии и вирусологии им Д. К. Заболотного НАН Украины разработан способ, включающий периодическое культивирование указанного штамма бактерий в лабораторных ферментерах на полусинтетической минеральной среде.

Тип продуцента

Получение препарата лектина предполагает использование морфологического варианта штамма В-7014 ii-типа. В то же время изменение условий культивирования способствует увеличению диссоциации и частоты образования S-вариантов. Динамика изменения pH и оптической плотности культуральной жидкости R- и S-форм типового штамма-продуцента при их выращивании в питательной среде одного состава и совершенно идентичных условиях в двух лабораторных ферментерах практически не имеет различий и характерна для периодического культивирования аэробных спорообразующих бактерий рода Bacillus.

Так, в первые три часа культивирования наблюдается некоторое снижение (на 0,3-0,5 ед.) показателя pH, после чего он непрерывно возрастает, достигая pH 7,7-7,9. Увеличение же оптической плотности продолжается до 12 часа культивирования, когда она достигает значений 1,6-1,9 (А. = 540 нм, 1 = 3 мм), затем происходит постепенное ее снижение до значений 1,2—1,4, что свидетельствует о начале процесса спорообразования.

В отношении показателя лектиновой активности культуральной жидкости следует отметить, что максимальный относительный прирост секреции лектинов в среду наблюдается в экспоненциальной фазе и фазе замедления роста. Нарастание лектиновой активности продолжается до 18-21 ч выращивания продуцента, при этом наблюдаются максимальные значения титра реакции гемагглютинации (РГА) культуральной жидкости: 128 для S-формы и 256 гемагглютинирующих единиц (ГАЕ) для Д-формы соответственно, после чего активность начинает снижаться. Таким образом, Д-форма продуцента демонстрирует тенденцию к большему уровню секреции внеклеточного лектина.

Процесс культивирования штамма В-7014 ведут до достижения максимального титра РГА культуральной жидкости, что, как правило, требует 18-21 ч.

 
Посмотреть оригинал
< Пред   СОДЕРЖАНИЕ ОРИГИНАЛ   След >
 
Популярные страницы