Меню
Главная
Авторизация/Регистрация
 
Главная arrow Химия arrow Технология полимеров медико-биологического назначения. Полимеры природного происхождения

12.4. Современные подходы к выделению белков плазмы крови

В настоящее время для получения препаратов белков плазмы крови используются два метода:

  • • фракционирование цельной плазмы крови;
  • • генно-инженерные способы (разд. 12.4.1.7).

На большинстве производств, работающих с препаратами плазмы, выделяют фактор VIII, фактор IX, альбумин и внутривенный иммуноглобулин. Факторы VIII и IX получают из цельной свежезамороженной плазмы. На второй стадии процесса плазма, лишенная факторов свертывания, поступает на фракционирование с применением спиртового осаждения при низкой температуре (—5-ь—3 °С) (метод Кона), после чего проводится выделение альбумина и внутривенного иммуноглобулина.

12.4.1. Фракционирование цельной плазмы крови

12.4.1.1. Фактор VIII

Как отмечено выше (см. табл. 12.2), фактор VIII, известный также как антигемофильный глобулин (р-глобулин), используют для лечения гемофилии А — генетического заболевания, вызванного недостатком р-глобулина, приводящего к тяжелым формам кровотечений.

Первым препаратом для лечения гемофилии А был криопреципитат, полученный в середине 1960-х гг. при размораживании свежезамороженной плазмы при температуре 0-2 °С. В состав криопреципитата входит до 99% балластных белков: фибриногена, фибронектина, альбумина и иммуноглобулинов. В процессе производства криопреципитата ряд плазменных белков — криоглобулинов — не переходит в раствор и может быть отделен от размороженной плазмы цетрифугированием.

Криопреципитат по существу еще не являлся полноценным препаратом фактора VIII, а представлял собой обогащенную им фракцию плазмы. Содержание целевого белка в препаратах криопреципитата не превышало 10 3 МЕ/мг. Лечение этим лекарственным средством сопровождалось большой нагрузкой на печень пациента, отрицательными побочными эффектами и риском переноса трансмиссионных инфекций.

В конце 1960-х — начале 1970-х годов появились первые, еще плохо очищенные препараты фактора VIII, сырьем для производства которых также служил криопреципитат. Для очистки этих препаратов применяли осаждение различными агентами: полиэтиленгликолем, глицином и хлоридом натрия. В результате были получены лекарственные средства с удельной активностью 2-10 МЕ/мг белка (1 МЕ, международная единица активности фактора VIII, эквивалентна количеству фактора VIII в 1 мл нормальной плазмы человека).

Более глубокая очистка препаратов фактора VIII была достигнута применением ионообменной хроматографии на слабоосновных (содержащих диэтиламиноэтиловые группы) или сильноосновных (содержащих триме- тиламиноэтиловые группы) анионообменных носителях. Внедрение ионообменной хроматографии позволило получить препараты с удельной активностью фактора VIII 100-200 МЕ/мг. В качестве контроля определяют активность фактора VIII нормальной плазмы в течение всего времени исследования. За единицу активности ингибитора фактора VIII принимают такое его количество в 1 мл плазмы, которое снижает активность фактора VIII на 50%.

 
Посмотреть оригинал
< Пред   СОДЕРЖАНИЕ ОРИГИНАЛ   След >
 

Популярные страницы