Меню
Главная
Авторизация/Регистрация
 
Главная arrow Экология arrow Контроль безопасности и качества продуктов питания и товаров детского ассортимента: практическое руководство

5.2. Оптимальные способы пробоподготовки при определении микотоксинов в пищевых продуктах

Современные способы пробоподготовки при определении супертоксикантов в продуктах питания [441, 442] основаны на использовании метода ТФЭ и очистки целевых соединений в патронах (картриджах) с модифицированными силикагелями. При этом отечественные сорбенты для ТФЭ не уступают лучшим зарубежным образцам [76].

5.2.1. Подготовка проб для определения афлатоксина Mi в молочных продуктах с использованием комплексной схемы на патронах Диапак С16М и Диапак С

Подготовка, концентрирование и очистка проб молока

Пробу молока (50 мл) центрифугируют на подходящем оборудовании в течение 5 мин при 1000 об./мин. Для определения афлатоксина Mi отбирают 20 мл супернатанта таким образом, чтобы избежать попадания жира. Подготовленную пробу молока (20 мл) нагревают до 40 °С и наносят на предварительно кондиционированный ацетонитрилом и водой патрон Диапак С16М со скоростью 3 капли в секунду. Затем патрон промывают 5 мл дистиллированной воды и высушивают, продувая воздухом в течение 1 мин. Элюаты отбрасывают. Патрон промывают 10 мл гексана и вновь высушивают в течение 1 мин.

Афлатоксин М] элюируют 6 мл хлороформа. Собранный элюат заливают в пластиковую воронку с помещенным на дне трехмиллиметровым слоем безводного сульфата натрия, откуда элюат стекает самотеком (экстракт М).

Подготовка проб сметаны и кисломолочных продуктов

В коническую колбу емкостью 250 мл помещают навеску 20 г сметаны или 40 мл кисломолочного напитка. Затем туда же вносят 10 мл водного раствора из 2 г хлорида натрия и 0,24 г лимонной кислоты и 100 мл хлороформа (все составные части предварительно подогревают до температуры 35—38 °С). Содержимое колбы встряхивают 2—3 мин, переносят в центрифужные стаканы и центрифугируют 15 мин при 3000—4000 об./мин. Отделяют нижний хлороформный слой, высушивают над 10 г безводного сульфата натрия, отфильтровывают, измеряют объем фильтрата и упаривают до 5—6 мл (экстракт М).

Окончательная очистка пробы

Экстракт М наносят на патрон Диапак С, кондиционированный бензолом, со скоростью 3—4 капли в секунду через пластиковую воронку. Осушают хлороформ сульфатом натрия и наносят 1 мл хлороформа на патрон после прекращения скапывания экстракта М. Афлатоксин Mi элюируют с патрона 10 мл 20%-ного ацетона в хлороформе или 7 мл 5%-ного метанола в хлороформе. Элюат собирают и упаривают досуха на роторном испарителе или в слабом токе азота при температуре не выше 40 °С. Сухой остаток сразу же перерастворяют в смеси вода/ацетонитрил (9:1 по об.) для последующего ВЭЖХ-анализа.

Комментарий:

  • — кондиционирование патрона Диапак С16М завершается промывкой водой — «растворителем» молока;
  • — предварительные операции — подогрев, центрифугирование (фильтрация) позволяют избавиться от сгустков молока;
  • — патрон Диапак С16М с ОФ-сорбентом эффективно адсорбирует из воды среднеполярные молекулы афлатоксина М[ наряду с липидами молока;
  • — перед вымыванием сконцентрированной фракции афлатоксина М| необходима предварительная промывка патрона водой для удаления белков и углеводов, а также гексаном для частичного удаления жиров;
  • — тонкую очистку афлатоксиновой фракции выполняют на патроне Диапак С с постоянной активностью силикагеля. Использование сухих элюентов и дополнительное высушивание элюатов (принципиальное отсутствие влаги!) препятствуют снижению сорбционной активности сорбента и способствуют построению воспроизводимых результатов;
  • — упаривание досуха является необходимым условием для перераство- рения пробы в водном ацетонитриле — подвижной фазе для ВЭЖХ- анализа в ОФ-режиме.
 
Посмотреть оригинал
< Пред   СОДЕРЖАНИЕ ОРИГИНАЛ   След >
 

Популярные страницы